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    細胞培養基
    CELL CULTURE MEDIUM
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    常見問題
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    細胞培養基
    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29

    細胞生長速度變慢或細胞形態變差的原因較為復雜,可從細胞,細胞培養液,污染,操作等方面去分析。比如:細胞衰老、細胞代次過高、細胞被胰酶消化過度,細胞培養液配制或儲存不當,支原體污染,細胞接種密度低,溫度/CO2濃度/pH等生化條件變化方面去分析,也需要考慮到血清是否有更換,血清來源不可靠,質量不穩定均會導致細胞狀態出現變化。

    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 13:34:04
    不建議配制培養液時調整配方的 NaHCO3 濃度,因為 HCO3-/CO2 體系的緩沖能力與 NaHCO3 濃度有關。
    如果過濾前培養液的 pH 過高,用 1mol/L HCL 進行調整。如果 pH 過低,用 1mol/L NaOH 進行調整。細胞培養液經過 0.22um 濾膜過濾后,pH一般會提高 0.1-0.2 左右。同時建議配液嚴格按照使用說明書進行。
    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 13:33:34
    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29

    細胞馴化過程是細胞優勝劣汰,適者生存的過程,狀態不好或者死亡的細胞特別容易結團。在馴化過程中可以采用低速離心,自然沉降,胰酶消化,添加硫酸葡聚糖等方法逐步去除較大的細胞結團,不斷傳代馴化。另外,細胞出現結團與細胞培養基適應與否,Ca 2+,Mg 2+離子濃度,種子細胞質量等有較大關系。

    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 13:33:01
    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29

    丙酮酸鈉可作為替代碳源。盡管細胞傾向于以葡萄糖作為碳源,但是在沒有葡萄糖時,細胞可以代謝丙酮酸鈉。

    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 13:32:05
    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29

    不添加生長因子。

    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 13:25:52
    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29

    內毒素的控制必須從培養基配方開發到最終生產進行全程監控。配方開發時動物源性蛋白的選擇與否、各類原材料的供應商篩選、生產車間凈化級別、生產設備和器具的消毒、物料干燥、生產過程控制、人員操作規范等全過程控制內毒素,嚴格執行 GMP 管理制度,生產高質量培養基。

    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 13:24:06
    可以。Vero 細胞一般需要馴化適應過程。
    在方瓶或者轉瓶進行無血清貼壁培養時,細胞逐級放大比例約 1:5-1:6 左右;
    在使用紙片載體進行反應器培養時,細胞的逐級放大比例需要達到 1:10 以上。
    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 13:23:31
    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29

    對于大部分昆蟲細胞,pH 在 6.0-6.4 范圍效果較好,最適滲透壓在 345-380mOsm/kg。

    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 13:22:42
    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29
    谷氨酰胺在溶液中很不穩定,容易降解,產生對細胞有毒害作用的氨離子。在37℃的環境中放置3天,培養液中的谷氨酰胺會有一些降解。
    所以,目前一些細胞培養基常補充谷丙二肽來代替谷氨酰胺。含谷氨酰胺的細胞培養液,建議現配現用,在 4℃冰箱保存時間不超過 2 周。若單獨補加谷氨酰胺濃縮液,則濃縮液應置于-20℃冰凍保存,用前加入培養基中。
    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 13:34:29
    0.1% 檸檬酸-結晶紫溶液染色1h以上基本可以把紙片載體上的細胞都染色,計數前需要用力搖晃裝有載體的離心管,使細胞充分脫落;染色液濃度太高會使細胞核破裂,因此不建議追求高染液濃度。
    分類:
    細胞培養基
    2021-04-18 19:06:50
    可以,但必要性不大,把溶氧控制在40%,通過PID控住浮動范圍在上下5%即可滿足細胞培養條件。
    分類:
    細胞培養基
    2021-04-18 19:07:53
    天信和的生物反應器是在控制柜內有分流前的匯總,通過一根管路總輸出,但一般不用二氧化碳進行酸度調節,只控制進堿(0.5mol/L-1mol/L的氫氧化鈉溶液)量來調整pH。
    分類:
    細胞培養基
    2021-04-18 19:07:29

    1)這是邊緣效應的體現,細胞工廠面積稍大,會有受熱不勻的情況,可以提前在工廠中加入培養液放置溫箱預熱好,現象會有所改善。

    2)目前我們的細胞工廠用的是普通材質的,較cell bind處理過的細胞貼壁生長效果會稍差一些,一般就使用一次,邊緣有少星細胞脫落影響不是很大。

    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 11:18:51

    建議2-3代,從復蘇時的10%NBS逐步降為無血清培養。

    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 11:23:30

    天信和630培養基所培養的Vero無血清細胞形態與進口培養基有一定區別,主要因為兩種培養基成分差異及天信和630培養基的冰點滲透壓高于進口培養基20%,但并不影響細胞生長與后期接毒,且天信和630培養基培養Vero細胞生長速率高于進口培養基,宿主細胞DNA、宿主細胞蛋白含量等明顯低于進口培養基,有明顯的優勢,目前暫時不做調整。

    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 11:24:47

    低密度接種,稍微延長培養時間,細胞也可生長至致密,但暫未嘗試低密度連續傳代,目前天信和推薦稍高密度接種,更有利于細胞狀態與增殖速度的保持。

    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 11:25:18

    細胞具體生長密度和細胞來源、細胞狀態、接種密度、培養基、環境控制有關,沒有比較固定的數量。但確定了具體細胞、培養基、培養條件,細胞每代數據應平行。

    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 11:25:59

    根據廠家提供培養基使用說明就能保證培養基安全有效。血清即可過濾前添加也可過濾后添加,具體根據無菌控制要求操作。

    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 11:26:38
    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29

    細胞工廠為一次性使用產品,不建議重復使用。如需反復使用,接毒后有大量完整細胞殘留,可用胰酶消化后PBS沖洗干凈輻照滅菌繼續使用;接毒后細胞破碎,可用堿液浸泡后PBS清洗干凈輻照滅菌繼續使用。

    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 11:27:19

    細胞消化時需要注意胰酶添加量控制,保證每1層細胞工廠有適量胰酶流入。胰酶作用消化時,密切關注細胞脫落變化情況,及時終止消化。如有輕微結團可在消化終止后用力搖晃細胞工廠的細胞懸液數次。

    分類:
    細胞培養基
    2021-04-29 11:27:36
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